胶卷分装是什么意思,怎样分装胶片电脑系统教程

2024-07-12 03:04:01

1.《纽约摄影学院摄影教程》这套教材一共有多少课，分为几章呀~

2.尼康相机使用常识

3.单反相机常识教程

高通量测序技术（High-throughput sequencing）又称“下一代”测序技术（Next-generation sequencing technology），以能一次并行对几十万到几百万条DNA分子进行序列测定和一般读长较短等为标志。

根据发展历史、影响力、测序原理和技术不同等，主要有以下几种：大规模平行签名测序（Massively Parallel Signature Sequencing, MPSS)、聚合酶克隆（Polony Sequencing）、454焦磷酸测序（454 pyrosequencing）、Illumina (Solexa) sequencing、ABI SOLiD sequencing、离子半导体测序（Ion semiconductor sequencing）、DNA 纳米球测序（DNA nanoball sequencing）等。基因分析仪(即DNA测序仪)，采用毛细管电泳技术取代传统的聚丙烯酰胺平板电泳，应用该公司专利的四色荧光染料标记的ddNTP(标记终止物法)，因此通过单引物PCR测序反应，生成的PCR产物则是相差1个碱基的3'末端为4种不同荧光染料的单链DNA混合物，使得四种荧光染料的测序PCR产物可在一根毛细管内电泳，从而避免了泳道间迁移率差异的影响，大大提高了测序的精确度。由于分子大小不同，在毛细管电泳中的迁移率也不同，当其通过毛细管读数窗口段时，激光检测器窗口中的CCD(charge-coupled device)摄影机检测器就可对荧光分子逐个进行检测，激发的荧光经光栅分光，以区分代表不同碱基信息的不同颜色的荧光，并在CCD摄影机上同步成像，分析软件可自动将不同荧光转变为DNA序列，从而达到DNA测序的目的。分析结果能以凝胶电泳图谱、荧光吸收峰图或碱基排列顺序等多种形式输出。

它是一台能自动灌胶、自动进样、自动数据收集分析等全自动电脑控制的测定DNA片段的碱基顺序或大小和定量的高档精密仪器。PE公司还提供凝胶高分子聚合物，包括DNA测序胶(POP 6)和GeneScan胶(POP 4)。这些凝胶颗粒孔径均一，避免了配胶条件不一致对测序精度的影响。它主要由毛细管电泳装置、Macintosh电脑、彩色打印机和电泳等附件组成。电脑中则包括资料收集，分析和仪器运行等软件。它使用最新的CCD摄影机检测器，使DNA测序缩短至2.5h，PCR片段大小分析和定量分析为10～40min。

由于该仪器具有DNA测序，PCR片段大小分析和定量分析等功能，因此可进行DNA测序、杂合子分析、单链构象多态性分析(SSCP)、微卫星序列分析、长片段PCR、RT-PCR(定量PCR)等分析，临床上可除进行常规DNA测序外，还可进行单核苷酸多态性(SNP)分析、基因突变检测、HLA配型、法医学上的亲子和个体鉴定、微生物与病毒的分型与鉴定等。

一、准备工作

1. BigDye测序反应试剂盒主要试剂是BigDye Mix，内含PE专利四色荧光标记的ddNTP和普通dNTP，AmpliTaq DNA polymerase FS，反应缓冲液等。

2. pGEM-3Zf (+) 双链DNA对照模板 0.2 g/L，试剂盒配套试剂。

3. M13(-21)引物 TGTAAAACGACGGCCAGT，3.2 μmol/L，即3.2 pmol/μl，试剂盒配套试剂。

4. DNA测序模板可以是PCR产物、单链DNA和质粒DNA等。模板浓度应调整在PCR反应时取量1 μl为宜。本实验测定的质粒DNA，浓度为0.2 g/L，即200 ng/μl。

5. 引物需根据所要测定的DNA片段设计正向或反向引物，配制成3.2 μmol/L，即3.2 pmol/μl。如重组质粒中含通用引物序列也可用通用引物，如M13(-21)引物，T7引物等。

6. 灭菌去离子水或三蒸水。

7. 0.2 ml或和0.5 ml的PCR管盖体分离。

8. 3 mol/L 醋酸钠(pH5.2) 称取40.8 g NaAc·3H2O溶于70 ml蒸馏水中，冰醋酸调pH至5.2，定容至100 ml，高压灭菌后分装。

9. 70%乙醇和无水乙醇。

10. NaAc/乙醇混合液取37.5 ml无水乙醇和2.5 ml 3 mol/L NaAc混匀，室温可保存1年。

11. POP 6测序胶。

12. 模板抑制试剂(TSR) 。

13. 10×电泳缓冲液。

14. 全自动DNA测序仪。

15. PCR仪。

16. 台式冷冻高速离心机。

17. 台式高速离心机或袖珍离心机。

二、PCR测序反应

1. 取0.2 ml的PCR管，用记号笔编号，将管插在颗粒冰中，按下表加试剂：

所加试剂测定模板管标准对照管

BigDye Mix 1 μl 1 μl

待测的质粒DNA 1 μl －

pGEM-3Zf (+) 双链DNA － 1 μl

待测DNA的正向引物 1 μl －

M13(-21)引物－ 1 μl

灭菌去离子水 2 μl 2 μl

总反应体积5 μl，不加轻矿物油或石蜡油，盖紧PCR管，用手指弹管混匀，稍离心。

2. 将PCR管置于9600或2400型PCR仪上进行扩增。98℃变性2 min后进行PCR循环，PCR循环参数为96℃ 10 s，50℃ 5 s，60℃4 min，25个循环，扩增结束后设置4℃保温。

三、醋酸钠/乙醇法纯化PCR产物

1. 将混合物离心，将扩增产物转移到1.5 ml EP管中。

2. 加入25 μl醋酸钠/乙醇混合液，充分振荡，置冰上10 min以沉淀DNA。12 000 r/min于4℃离心30 min，小心弃上清。

3. 加70%(V/V)的乙醇50 μl洗涤沉淀2次。12 000 r/min于4℃离心5 min，小心弃上清和管壁的液珠，真空干燥沉淀10～15 min。

四、电泳前测序PCR产物的处理

1. 加入12 μl的TSR于离心管中，剧烈振荡，让其充分溶解DNA沉淀，稍离心。

2. 将溶液转移至盖体分离的0.2 ml PCR管中，稍离心。

3. 在PCR仪上进行热变性(95℃ 2 min)，冰中骤冷，待上机。

五、上机操作1. 按仪器操作说明书安装毛细管，进行毛细管位置的校正，人工手动灌胶和建立运行的测序顺序文件。　　2. 仪器将自动灌胶至毛细管，1.2 kV预电泳5 min，按编程次序自动进样，再预电泳(1.2 kV，20 min)，在7.5 kV下电泳2 h。　　3. 电泳结束后仪器会自动清洗，灌胶，进下一样品，预电泳和电泳。　　4. 每一个样品电泳总时间为2.5 h。　　5. 电泳结束后仪器会自动分析或打印出彩色测序图谱。

六、序列分析　仪器将自动进行序列分析，并可根据用户要求进行序列比较。如测序序列已知，可通过序列比较以星号标出差异碱基处，提高工作效率。

七、仪器清洗　测序完毕按仪器操作规程进行仪器清洗与保养。

八、计算

1. 测序反应精确度计算公式：100%－差异碱基数(不包括N数)/650×100%。

2. 差异碱基即测定的DNA序列与已知标准DNA序列比较不同的碱基，N为仪器不能辨读的碱基。 SILVER SEQUENCETM DNA测序系统是一种无放射性的序列分析系统，它通过灵敏的银染方法检测凝胶中的条带。银染提供了一种对于放射性或荧光法来说更加快速，廉价的替代方法。测序结果可以在同一天内得到；电泳完成后经90分钟就可读序，这是常规的放射性测序法做不到的。此外，SILVER SEQUENCETM系统用未修饰的5'OH寡聚核苷酸作为引物，减少了特殊修饰寡聚核苷酸的花费。该系统不需要放射性方法中对同位素的谨慎操作，也不需要荧光法或化学发光技术的昂贵试剂。另外，也不需要象大多数荧光法那样用仪器来检测序列条带。

Taq DNA聚合酶在95℃时极强的热稳定性。本系统利用的测序级Taq DNA聚合酶是一种Taq DNA聚合酶的修饰产品，对于双链DNA模板有非常好的效果，具有高度的准确性，能产生均一的条带，且背景低。

SILVER SEQUENCETM系统包含被修饰的核苷酸混合物，如7-去氮dGTP（7-deaza dGTP，或dITP）替代dGTP可清除由GC丰富区域所引起的条带压缩现象。

退火温度是热循环测序中最重要的因素。高退火温度可减少模板二级结构。提高引物结合模板配对的严谨性。链重退火和模板二级结构则限制了小片断PCR产物（<500bp）得到清楚的序列数据的能力。引物延伸起始于每个循环的退火阶段。在较低温度时，聚合酶可能会遇到坚固的二级结构区域，它可导致聚合酶解离。则在四个电泳道中均有同一相对位置的条带。因为这些原因，应该使用尽可能高的退火温度。对于有牢固二级结构的模板建议使用95℃变性、70℃退火/延伸的循环模式。一般来说，较长的引物及GC含量高的引物能得到较强的信号。实验结果表明，>24mer的GC含量约为50%的引物可得到最佳结果。

由于本系统采用热循环装置, 与常规的测序方法相比具有如下几点好处：(1).本方法线性扩增模板DNA产生足够的产物使银染技术能够检测序列条带，测序反应需要0.03～2pmol模板DNA，随模板种类而定。(2). 在每一个变性循环中的高温可以取代对双链DNA（dsDNA）模板的碱变性及乙醇沉淀过程，变性循环也有助于消除由于线性dsDNA模板（如PCR反应产物）快速重退火所引起的问题。(3). 高温聚合酶反应减弱了DNA模板的二级结构，允许聚合酶穿过高度二级结构化的区域。

一、试剂准备

1. SILVER SEQUENCETM DNA测序试剂盒。

2. 丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺储备液（38%丙烯酰胺 W/V，2%甲叉双丙烯酰胺 W/V）：95 g丙烯酰胺，5 g甲叉双丙烯酰胺溶于140 ml 双蒸水中，定容至250 ml，0.45 mm过滤器过滤后，贮于棕色瓶中，置于4℃冰箱可保存2周。

3. 10%过硫酸铵，0.5 g过硫酸铵溶于4 ml水中，定容至5 ml，应新配新用。

4. 10×TBE缓冲液（1 mol/L Tris， 0.83mol/L 硼酸，10 mmol/L EDTA）： 121.1 g Tris，51.35 g硼酸，3.72 g Na2EDTA ·2H2O，溶于双蒸水中定容至1升，置于4℃下可贮存2周，其pH约为8.3。

5. TBE电极缓冲液：10×TBE 缓冲液稀释至1×TBE备用。

6. TEMED

7. 固定/停止溶液：10%冰醋酸（V/V）配制2升备用。

8. 染色溶液：硝酸银2 g，甲醛3 ml，溶于2升超纯水中备用。

9. 显影溶液：60 g碳酸钠（Na2CO3)溶于2升超纯水中，使用前加3 ml 37%甲醛和40 ml硫代硫酸钠溶液（10 mg/ml）。

10. 95%乙醇。

11. 0.5%冰乙酸。

12. Sigmacote （Sigma CAT. #SL-2）。

二、测序反应

1. 对于每组测序反应，标记四个0.5 ml eppendorf管（G、A、T、C）。每管加入2 ml适当的d/ddNTP混合物（d/ddNTP Mix）。各加入1滴（约20 μl）矿物油，盖上盖子保存于冰上或4℃备用。

2. 对于每组四个测序反应，在一个eppendorf管中混合以下试剂：

（1）样品反应：

质粒模板DNA ：2.1 pmol

5×测序缓冲液： 5 ml

引物： 4.5 pmol

无菌ddH2O 至终体积16 ml

（2）对照反应

pGEM-3Zf（+）对照DNA（4 mg）：4.0 ml

5×测序缓冲液： 5 ml

pUC/M13正向引物（4.5 pmol）：3.6 ml

3. 在引物/模板混合物（以上第2步）中加入1.0 ml测序级Taq DNA聚合酶（5 μ/ml）。用吸液器吸动几次混匀。

4. 从第3步的酶/引物/模板混合物中吸取4 ml加入每一个d/ddNTP混合物的管内。

5. 在微量离心机中离心一下，使所有的溶液位于eppendorf管底部。

6. 把反应管放入预热至95℃的热循环仪，以注意中循环模式为基准，开始循环程序。对于每个引物/模板组合都必须选择最佳退火温度。下列程序一般能读出从引物开始350碱基的长度。

7. 热循环程序完成后，在每个小管内加入3 μlDNA测序终止溶液，在微量离心机中略一旋转，终止反应。

注意

（1）测序所用模板DNA的量一般按下面要求加入：

模板种类/长度模板量

200 bp（PCR产物）：16 ng（120 fmol）

3000～5 000 bp（超螺旋质粒DNA）： 4 mg（2 pmol）

48 000 bp（λ,粘粒DNA）： 1 mg（31 fmol）

由于超螺旋质粒产生的信号比松弛的线性双链DNA弱，因此使用超螺旋质粒作为模板时其用量要比其它模板大一些。

（2）计算与4.5 pmol相当的引物纳克数可用以下一般公式：

4.5 pmol=1.5 ng×n，其中n为引物碱基数

计算与1p mol相当的引物微克数可用以下一般公式：

dsDNA：1 pmol=（6.6×10mg）×n，其中n为模板碱基对数

ssDNA：1pmol=（3.3×10mg）×n，其中n为模板碱基数

（3）为阻止Taq DNA聚合酶延伸非特异性退火引物，热循环仪必须预热至95℃。温度变换应越快越好。下面的循环时间不包括变温时间。如果你无法确定使用何种模式，建议从模式1开始。

模式1：适用于引物<24碱基或GC含量<50%

95℃ 2分钟，然后： 95℃ 30秒（变性），42℃ 30秒（退火），70℃ 1分钟（延伸）。

模式2：适用于≥24碱基或略短的GC含量≥50%的引物。

95℃ 2分钟，然后：95℃ 30秒（变性），70℃ 30秒（退火/延伸）。

（4）在加入终止溶液之后样品可在4℃保存过夜。

三、测序凝胶板的制备

1. 玻璃板的处理

银染测序的玻璃板一定要非常清洁，一般先用温水和去污剂洗涤，再用去离子水冲洗玻璃板，除去残留的去污剂，最后用乙醇清洗玻璃板。玻璃板上遗留的去污剂微膜可能导致凝胶染色时背景偏高（棕色）。短玻璃板经粘合溶液处理可将凝胶化学交联于玻璃板上。这一步对于在银染操作过程中防止凝胶撕裂至关重要。

（1）短玻璃板的处理

① 在1 ml95%乙醇，0.5%冰乙酸中加入5 ml粘合硅烷（Bind Silane），配成新鲜的粘合溶液。

② 用经浸透新配的粘合溶液浸透的吸水棉纸擦拭仔细清洗过并已经自然干燥的玻璃板，整个板面都必须擦拭。

③ 4～5分钟后，用95%乙醇单向擦玻璃板，然后略用力沿垂直方向擦拭。重复三次这一清洗过程，每次均须换用干净的纸，除去多余的粘合溶液。

注意

① 在95%乙醇单向擦玻璃板时过度用力会带走过多的粘合硅烷，使凝胶不能很好地粘附。

② 准备长玻璃板之前要更换手套，防止粘染粘合硅烷。

③ 防止粘合溶液沾染在长玻璃板上是很重要的，否则将导致凝胶撕裂。

（2）长玻璃板的处理：

① 用浸透Sigmacote溶液的棉纸擦拭清洗过的长玻璃板。

② 5～10分钟后用吸水棉纸擦拭玻璃板以除去多余的Sigmacote溶液。

注意

① 用过的凝胶可在水中浸泡后用剃须刀片或塑料刮刀刮去。玻璃板须用去污剂完全清洗。或者凝胶用10%NaOH浸泡后除去。为防止交叉污染，用于清洗短玻璃板的工具必须与清洗长玻璃板的工具分开，如果出现交叉污染，以后制备的凝胶可能撕裂或变得松弛。

2. 凝胶的制备

（1）玻璃板经粘合硅胶和Sigmacote处理后，即可固定玻璃板。该方法是用0.2 mm或0.4 mm厚的边条置于玻璃板左右两侧，将另一块玻璃板压于其上。在长玻璃板的一侧插入鲨鱼齿梳平的一面边缘，用夹子固定住。

（2）根据所需要的凝胶浓度，按下表制备测序凝胶，一般6%～8%的胶浓度可获得较好的结果。配制过程中，先用适量双蒸水溶解尿素，再加入Acr&Bis和10×TBE缓冲液，再用双蒸水调终体积至99.2 ml，并用0.45 mm的滤膜过滤，然后加过硫酸铵和TEMED。溶解尿素时不必加热。如果确需加热则应等溶液完全冷却后，方可加入TEMED和过硫酸铵。一般在胶灌制后4～6分钟，即开始聚合，如果聚合不好，则应使用高浓度的TEMED和过硫酸铵。

（3）胶配制好后，即可灌制胶板。一般是将凝胶沿着压条边缘缓慢地倒入玻璃板的槽中，倒完后，静止放置使之聚合完全。

注意

① 使用夹子固定玻璃板时，最好夹子的力量稍大一些，防止因力量不足使灌胶的过程中出现漏胶液现象。

② 灌制凝胶的过程中要严防产生气泡，否则影响测序的结果。

四、电泳

1. 预电泳

（1）当凝胶聚合完全后，拨出鲨鱼齿梳，将该梳子反过来，把有齿的一头插入凝胶中，形成加样孔。

（2）立即将胶板固定在测序凝胶槽中，一般测序凝胶槽的上下槽是分开的，因而只有在固定好凝胶板后，方能加入TBE缓冲液。

（3）稀释10×TBE缓冲液至1×TBE，将该缓冲液加入上下二个电泳槽中，去除产生的气泡，接上电源准备预电泳。

（4）有些电泳槽，如LKB的Macrophor等是使用水浴加热的，则应先将水浴加热至55℃后进行预电泳。有的不使用水浴加热，依靠电泳过程中自身产生的热进行保温，如上海求精有机玻璃仪器生产的测序电泳槽，这种槽需夹上二块散热铝板，使整个凝胶板的温度一致。

（5）按30 V/cm的电压预电泳20～30分钟。预电泳的过程是去除凝胶的杂质离子，同时使凝胶板达到所需的温度。高温电泳可防止GC丰富区形成的发夹状结构，影响测序的结果。

注意

① 用鲨鱼齿梳制作加样孔时，应注意将齿尖插入胶中0.5mm左右，千万注意不能使加样孔渗漏，否则得不到正确的结果。

② 应时刻注意上面电泳槽中的缓冲液是否渗漏，否则极易造成短路而损坏电泳仪。

2. 样品的制备

当在预电泳时，即可进行样品的制备，将反应完毕的样品在沸水浴中加热1～3分钟，立即置于冰上即可。如果样品长时间不用，则应重新处理。可使用4～6%聚丙烯酰胺凝胶，胶厚0.4 mm。厚度小于0.4 mm的胶可能导致信号太弱。加样时不必吸去上层覆盖的矿物油，但要小心地吸取矿物油下的蓝色样品。

3. 上样及电泳

关闭电泳仪，用移液枪吸缓冲液清洗样品孔，去除在预电泳时扩散出来的尿素，然后立即用毛细管进样器吸取样品，加入样品孔中。上样顺序一般为G、A、T、C。加样完毕后，立即电泳。开始可用30 V/cm进行电泳，5分钟后可提高至40～60 V/cm，并保持恒压状态。一般来说，一个55 cm长，0.2 mm厚的凝胶板，在2500 V恒压状态下电泳2小时即可走到底部，同时在电泳过程中，电流可稳定地从28 mA降至25 mA。为了能读到更长的序列，可采用两轮或多轮上样。

注意

① 上样电泳时，一定要注意凝胶板的温度是否达到55℃左右，如果还没有达到，则应等温度达到后才能上样电泳。

② 一般来说电泳时，不宜使用太高的电压，因为太高的电压会使凝胶的分辨率降低，并且使带扩散。电泳中可进行恒功率电泳。

五、测序凝胶的银染

染色过程要求凝胶浸在塑料盘中。因而至少使用两个盘子，大小与玻璃板类似。在盘中加入新鲜溶液之前须用高质量的水洗涤盘子。

1. 电泳完毕后用一个塑料片子小心地分开两板，凝胶应该牢固地附着在短玻璃板上。

2. 固定凝胶：将凝胶（连玻璃板）放入塑料盘，用固定/停止溶液浸没，充分振荡20分钟或直至样品中染料完全消失，胶可在固定/停止溶液中保存过夜（不振荡）。保留固定/停止溶液，用于终止显影反应。

3. 洗胶：用超纯水振荡洗胶3次，每次2分钟。从水中取出，当转移至下一溶液时拿着胶板边沿静止10～20秒，使水流尽。

4. 凝胶染色：把凝胶移至染色溶液充分摇动30分钟。

5. 凝胶显影

（1）在显影溶液中加入甲醛（3 ml）和硫代硫酸钠溶液（400 μl）以完成显影液的配制。

（2）从染色溶液中取出凝胶放入装有超纯水的盘中浸洗5～10秒。注意，把凝胶从超纯水转移到显影溶液的总时间不能长于5～10秒。浸泡时间过长则导致信号微弱或丧失信号。若浸泡时间过长，可重复第五步用染色液浸泡。

（3）立刻将凝胶转移至1升（总量的一半）预冷的显影液充分振荡直至模板带开始显现或开始出现第一批条带，把凝胶移入剩下的1升显影液中继续显影2～3分钟或直至所有条带出现。

6. 固定凝胶：在显影液中直接加入等体积的固定/停止溶液。停止显影反应，固定凝胶。

7. 在超纯水中浸洗凝胶两次，每次2分钟，注意在本操作中戴手套拿着胶板边缘避免在胶上印上指纹。

8. 将凝胶置于室温干燥或用抽气加热法干燥。在可见光灯箱或亮白，**背景（如纸）上观察凝胶，若需永久保存的记录, 则可用EDF胶片保留实验结果。

注意

测序产物的银染是显现序列信息的一种新方法，本系统的成败受几个因素的影响

① 水的质量对于染色的成功极其重要。超纯水（NANOpureR或Milli-QR的水）或双蒸水可获得较好的效果，如果水中有杂质，则低分子量条带可能无法出现。

② 碳酸钠也非常重要。使用新鲜的，美国化学学会级碳酸钠较好，如Fisher和Kodak ACS试剂级碳酸钠（Fisher Cat #S263-500或S262-3，或Kodak Cat #109-1990），一般可获得较好的结果。

③ 色后的洗涤步骤是非常关键的。如果凝胶洗涤时间太长，银颗粒会脱离DNA，产生很少或没有序列信号。如果洗涤时间过长，染色步骤可以重新进行。

④ 如果凝胶厚度超过0.4 mm或丙烯酰胺浓度高于4～6%，则有必要延长固定和染色的时间。如果凝胶比0.4 mm薄，染色反应后的洗涤必须缩短至不超过5秒。

⑤ 在室温下进行所有步骤，显影反应除外。显影溶液必须预冷至10～12℃以减小背景杂色。注意：临用前在显影溶液中加入甲醛和硫代硫酸钠。用新配的染色及显影溶液。不要重复使用任何溶液。

六、EDF胶片显影

使用EDF胶片可增强测序条带的对比度，如果测序胶上条带很淡，我们建议把数据转移至EDF胶片，银染胶在其影像转移至EDF胶片之后可增强条带可读性。

1. 在暗室内，将染色过的粘于玻璃板的凝胶（胶面向上）置于荧光灯箱上。如有合适的漫射板，亦可用白灯箱，为确保曝光时间，用一小条EDF胶片曝光不同时间，检查不同的曝光强度，一般曝光20～40秒可得较好结果。

2. 在红灯下找到EDF胶片有缺刻的一角，然后把胶片置于凝胶上，使缺口位于左上角。由于EDF胶片是单面的，因此必须确保缺口在左上角。

3. 在EDF胶片上放置一干净、干燥的玻璃板，开亮灯箱约20秒。

4. 用冲显放射自显影胶片的步骤手工显影EDF胶片，可使用下列操作过程：

（1）在Kodak GBX显影液中显影1～5分钟；

（2）水洗1分钟；

（3）在Kodak GBX定影液中定影3分钟；

（4）水洗1分钟。

注意

① 进行EDF胶片显影之前凝胶必须完全干燥。戴手套进行操作，以免印上指纹。同时注意EDF胶片不能用自动胶片处理器。

② 对于不同的光源最佳曝光时间可能不同，通过对一小条EDF胶片曝光不同时间以选择你所用光源的最佳曝光时间，参阅胶片说明书。

③ 曝光时间短则EDF胶片影像较深，曝光时间长则有助于减弱背景。 “鸟枪法”是一种由生物基因组提取目的基因的方法。首先利用物理方法(如剪切力、超声波等)或酶化学方法(如限制性内切核酸酶)将生物细胞染色体DNA切割成为基因水平的许多片段，继而将这些片段与适当的载体结合，将重组DNA转入受体菌扩增，获得无性繁殖的基因文库，再结合筛选方法，从众多的转化子菌株中选出含有某一基因的菌株，从中将重组的DNA分离、回收。

这种方法也就是应用基因工程技术分离目的基因，其特点是绕过直接分离基因的难关，在基因组DNA文库中筛选出目的基因。可以说这是利用“溜散弹射击”原理去“命中”某个基因。由于目的基因在整个基因组中太少太小，在相当程度上还得靠“碰运气”，所以人们称这个方法为“鸟枪法”或“”实验法。

一、用限制酶切下目的片段的大片段InsertDNA，并用Agarose凝胶电泳进行回收。

二、对回收的大片段DNA用物理方法（如超声波等）进行切断处理，然后用T4DNAPolymerase对小片段DNA进行末端平滑化。

三、进行Agarose电泳，切胶回收1kbp～2kbp的小片段DNA。然后用BcaBestDNAPolymerase在DNA的3'端加上一个A碱基。

四、把加上A-tail的DNA片段连入T-Vector中，然后转化，挑选克隆。

五、对阳性克隆（含1kbp～2kbpInsert）进行DNA测序。

六、对数据进行编辑，最后连成一条大片段的DNA序列。

《纽约摄影学院摄影教程》这套教材一共有多少课，分为几章呀~

**胶片的冲洗工艺和普通胶卷的冲洗工艺太一样。

**胶片是将感光乳剂涂布在透明柔韧的片基上制成的感光材料，包括**摄影用的负片、印拷贝用的正片、复制用的中间片和录音用的声带片等。这些胶片的结构大体相同，都由能感光的卤化银明胶乳剂层和支持它的片基层两大部分组成。

分类

1、彩色摄影方法

摄影史中出现的彩色摄影方法多达数百种，但从原理上讲不外以下两大类：一类是由不同比例的红、绿、蓝三原色光相加，得到各种颜色以至白色，所以叫做加色法。另一类是从白光中减去不同比例的红、绿、蓝三原色而得到各种深浅不同的色彩以至黑色，故称为减色法。

2、减色法彩色胶片

彩色**的摄制采用的是减色法彩色胶片。最早成功的减色法彩色**要推1927年问世的特艺色，由于拷贝的制作采用染料转印法，故又称染印法，发明人为H.T.卡尔马斯博士。

尼康相机使用常识

给个目录楼主对照下吧！

纽约摄影学院摄影教程

第一章摄影基本功 6

一、摄影家的眼力 6

二、好照片要有主题 7

三、一幅好照片要有一个能吸引注意力的主体 8

四、好照片画面要简洁 9

五、对三项基本原则的运用 10

六、找出最好的一张 12

七、观察你周围的世界 12

第二章照相机与镜头 13

一、摄影所涉及的问题 13

二、照相机的基本部件 14

三、照相机的类型 15

四、本课程需要哪种照相机 18

五、镜头 19

六、镜头速度 20

七、什么是孔径 23

八、焦距 26

九、焦距与影像大小的关系如何 27

十、什么是标准镜头、广角镜头和远摄镜头 28

十一、什么是折反射镜头 31

十二、什么是变焦镜头 32

十三、什么是微距镜头 34

十四、什么是炫光 35

十五、什么是透视畸变 36

十六、什么是肖像镜头 37

十七、什么是线性畸变 38

十八、什么是鱼眼镜头 40

十九、代表作品赏析 41

第三章取景与快门 44

一、取景系统 44

二、光学取景器和测距器 45

三、单镜头反光（SLR）取景器 47

四、双镜头反光（TLR）取景器 48

五、毛玻璃机背 49

六、视频取景器 50

七、聚焦 50

八、聚焦的方法 51

九、景深 55

十、景深应用的技巧 58

十二、快门速度 63

十三、快门速度与运动 65

十四、快门速度的选择 66

十五、代表作品赏析(二) 69

十六、如何得到更清晰的照片 72

十七、快门速度与照相机震动 75

十八、有用的附件 76

十九、照相机震动还是焦点失调 77

二十、怎样维护照相机 78

二十一、代表作品欣赏(三) 80

第四章胶片 82

一、胶片 82

二、胶片的类型和尺寸 83

三、胶片特性 89

四、胶片速度 89

五、颗粒度 92

六、反差 93

七、你将采用何种黑白胶片 93

八、彩色胶片原理 94

九、胶片的彩色上怎样形成的 95

十、彩色负片 97

十一、彩色反转片 97

十二、彩色胶片选择 99

十三、彩色胶片特性 100

十四、选择你的彩色胶片 100

十五、高反差胶片 102

十六、新型彩色胶片 102

十七、伊斯门5247和5294 103

十八、彩色平衡 104

十九、盘片分装 105

二十、胶片的储存和保护 106

二十一、互易律失效 107

第五章曝光 108

一、什么是曝光 108

二、如何确定适当的曝光量 109

三、愚蠢的测光表 112

四、测光表是如何工作的 113

五、如何使用测光表 115

六、使用18％灰板 119

七、什么是胶片的宽容度 120

八、胶片的宽容度到底意味着什么 123

九、高反差场景的曝光 124

十、获取完美的曝光 127

十一、使用自动曝光照相机 129

十二、片状颗粒胶片 129

十三、曝光彩色胶片 130

十四、彩色负片的曝光 131

十五、彩色反转片的曝光 131

十六、强迫显影彩色胶片 133

十七、以完美的照片为目标 134

十八、特殊曝光的场合 135

第六章黑白胶片显影 137

一、显影的基础 137

二、定温定时法 138

三、需用设备 139

四、显影罐选择 139

五、显影化学品 140

六、胶片显影布置 141

七、化学品储存 143

八、温度控制 144

九、显影步骤 145

十、底片存放 150

十一、观察底片 151

十二、密度 152

十三、反差 154

十四、反差比较 155

十五、底片鉴评 156

十六、显影常见问题 158

十七、规范化 161

十八、几项深层的操作 162

第七章滤光镜 162

一、滤光镜 162

二、天光镜和暖调滤光镜 164

三、偏振滤光镜 167

四、滤光镜的尺寸 169

五、荧光照明用滤光镜 170

六、黑白摄影中如何使用滤光镜 171

七、滤光镜系统 175

八、特殊滤光镜 176

九、使用滤光镜的曝光 178

十、彩色补偿（CC）滤光镜 178

十一、使用纽约摄影学院滤光镜计算盘 180

第八章培养你的眼力 181

一、构图与眼力 181

二、通过布局突出重点 182

三、通过物体大小的比例关系突出重点 184

四、通过搭画框的方法突出主体 186

五、通过用光来突出主体 189

六、通过会聚线条来突出重点 190

七、通过会聚线条来突出重点 191

八、通过重复来突出重点 191

九、常见错误及其预防方法 193

第九章自然光 197

一、光线介绍 198

二、光的基本特性 198

三、光的基本方向 199

四、正面光 199

五、45°侧光 200

六、90°侧光 201

七、逆光 202

八、怎样在室外拍摄人像 203

九、旅行摄影 204

十、装备 205

十一、从拂晓到黄昏拍摄旅行照片 209

十二、极端的天气条件 211

十二、极端的天气条件 212

十三、在机场 213

第十章现场光 214

一、现场光 214

二、为什么使用现场光 214

三、现场光摄影技术 215

四、现场光摄影技巧 215

五、使用测光表 216

六、现场光和显影 217

第十一章人造光 223

一、人造光 223

二、泛光灯和聚光灯 223

三、家庭摄影室的布置 224

四、灯的类型 225

五、家庭摄影室的基本照明设备 226

六、摄影室照明设备的照明特性 227

七、基本布光过程 229

八、布光实践 231

九、练习一：用光表现物体的外形 233

十、练习二：展示物体的质感 235

十一、练习三：展示物体的透明度 237

十二、照明反差 238

十三、测光表的使用 239

单反相机常识教程

1.尼康的数码相机使用方法

尼康数码相机有很多型号，这里以尼康D7000为示例，说明拍摄录像的功能。

工具/材料：尼康d7000

操作方法：

1、摄像参数的设置。先点击相机左侧的“menu”，调出“动画设定”，选择想要的动画品质。

2、退出动画品质设置后，可以看到有“麦克”，“目标位置的选项”，可以设置录像时声音的大小和录像储存的位置。

3、设置光圈参数。转到模式转盘，一般拍摄录像是调到p档，也就是程序优先模式。

4、开始拍摄。拨动右侧的lv开关，在点击红色按钮就可以开始拍摄了。

5、结束拍摄。只需要再点击一下右侧的红色按钮即可。

6、点击左上方的?播放按钮就可以看到刚才拍摄的视频了。

2.求单反知识普及,推荐使用的机子,本人小白

我帮朋友选择过D3100,D7000，单反选择的东西很多，要看您用来干什么了不同的想法，不同的功能，有不同的适合人群新手的话，我就罗嗦些啦：1、单反，就是单镜头反光照相机，简单讲就是把传统经典机械式，高档，使用反光板的相机的胶卷换成了数码感光元件的数码相机，它在很多性能（速度，宽容度，景深，高感）上有卡片机完全无法比拟的优势，限于篇幅跟新手能否理解的问题，这个在百度百科上面有详细的原理解释，新手直接把它看做“取景窗看到的即为拍到的，拍照速度很快（3张到8张每秒），价格不菲的高档相机”即可2、您可以说说看自己平时喜欢拍什么东西（人像，风光还是静物之类），买相机来多久会用一次，经常出去旅游不，后期打算在相机上投入多少？我们好帮您解答选购单反，需要看的参数很多，稍微给您点有关参数的建议：单反很昂贵，您要根据自己需要慢慢选择单反的参数太多了，列出几个关键参数您值得往上砸钱的：1、感光元件大小：菜鸟会说像素越高越好，老鸟会说感光元件越大越好，感光元件越大意味着高感下表现越优秀，宽容度越高，CMOS优于CCD记住：像素绝对不是越高越好，像素只是参考作用，成像质量跟机身，镜头都有关！2、对焦系统：对焦点越多，越好，同样对焦点情况下十字对焦点越多，性能越优秀，对焦系统对抓拍，捕捉快速镜头十分有用，是单反的主要参数之一3、机身，小的，塑料的比较低档，大的，金属的比较高档，实在对各种参数感到迷糊的话，这个是个一定管用的判断标准4、是否有机身对焦马达，有对焦马达的能自动对焦，否则只能上有对焦马达的镜头或者手动对焦，这个决定了您是否能用性价比高的低端镜头，带马达的镜头都很贵，相比机身对焦有些慢，而且比较高档，您得慎重考虑5、取景器覆盖率，这个是光学性能，非常重要！范围越大愈好，高档机基本都是100%6、连拍速度决定抓拍性能，处理器型号影响最终画质（越新的处理器越好）都比较重要7、全画幅机跟半幅机在画质，宽容度上有质的区别，对镜头选择也非常重要8、是否有钱上一支成像好的镜头是最终照片质量的决定因素9、机身防抖：有一个防抖的机身是非常方便的10、高感光度表现：夜景（特别是日出日落）拍摄非常重要，这个要看具体机身对比，实际效果跟参数关系不大不值得砸钱的功能：1、视频照相机CMOS连续工作会影响寿命，而且实用意义不大，您买的毕竟是相机，不是DV吧？2、LCD分辨率：照片在电脑上看都是一样的，毕竟您最终会用电脑而不是相机来欣赏作品吧3、过高的快门速度：例如1\4000秒快门跟 1\8000秒快门区别不大，那个是拿来拍子弹穿过苹果啥的用。

4、除尘系统：没有良好的使用习惯，再好的除尘系统也得老老实实拿到售后去清洁。5、是否翻转屏：基本就是一个噱头6、手感，外观：仁者见仁智者见智了，每个人的感觉都不一样，您感觉“专业”的机身，别人有可能感觉是“笨重”也说不定。

7、N,C之选：新手价位的话选哪家都差不多，作为佳能黑的我认为低端尼康还是比较厚道的，而玩高端的话就应该选佳能了，低端的宾得性价比非常高也值得考虑（纯个人意见）具体机型的话新手没必要太花钱太奢侈，留着钱以后技术成熟了上好机器不迟，且更加保值：个人推荐D3100+18 105足够强大了，特别是对新人有入门引导功能，这个很贴心，我某位朋友刚入手了一个这种套机，现在开开心心地在北京旅游呢或者：宾得KR套机，对于新人也足够强大了补充：可以学习的摄影网站的话可以上上国内著名的色影无忌，蜂鸟虚心请教的话还是有高人在的，不过那里经常爆发口水，水比较深教材的话我向您推荐《纽约摄影学院教材》，非常经典的入门书，这本书您看要完前半部分，自然就知道自己需要什么相机，需要什么镜头了希望能帮上忙。

3.单反相机滤镜使用常识

相机附加镜常识相机可以安装附加镜头，这样可以得到其它作用和特殊的效果。

附加镜头的种类很多，下面讲讲比较常见的几种。（1）UV镜。

UV镜一种最常用的附加镜，它主要用于减少紫外线的摄入，这在使用胶卷意义较大，因胶卷对紫外线较敏感。而现在主要是起镜头保护作用。

现在另有一种MC镜，它就叫镜头保护镜。（2）偏振镜（PL,CPL）说起偏振镜大家好象比较陌生，其实我们每个人身边都在使用：凡是液晶类的显示器件，都必须使用偏振滤光，否则你什么也看不到。

相机用的偏振镜的镜片呈深灰色，在玻璃片之间夹有一层经过定向处理的晶体薄膜，从外形上看它比一般的滤镜略显厚一些。在摄影过程中，偏振镜可能是使用最多的一种滤镜，它的镜片可以旋转，从而逐渐削除反射光和光斑。

常用以滤掉玻璃窗反射光，使玻璃更加清晰透明，也用以滤掉的天空中的偏振光，使天际间的对比更加清晰、真实。除此之外，还经常应用偏振镜消除非金属表面的炫光和反射光。

目前，好象偏振镜已经成为相机的必备装备。（3）中灰镜，（ND）在一些光线过分明亮的环境中，如海滨、雪地、沙漠等场合，尽管曝光组合已达到极限（即进光量已经最小），可仍然无法做到适度曝光。

此时，为了使景物的亮度适应曝光组合，就需要选用能够降低亮度的中性灰滤光镜，将景物的亮度普遍降低，达到曝光所需要的亮度。这种降低亮度的中性灰滤光镜在**拍摄中一般是必不可少的。

中灰镜主要作用是：1、降低通光量，在强光下想使用大光圈，比如，在强光下想使用大光圈做前后景虚化，就可以加中灰镜；2、在EV值较高的情况想降低快门速度，比如：在很亮的地方想拍摄动感（动感虚化）的效果，可加上中灰镜。3、在旅游、或是大街上，加上适当的中灰镜，可延长曝光时间，可起到虚化背景移动物体和行人，起到突出主体的特殊效果。

（4）星光镜这是个比较有趣的滤镜，这是在镜片上刻有方格、三角形、米字形的细线。星光镜会轻微地柔化影像，它可以将画面内的光源变成许多星点，营造浪漫而充满童趣的意境。

在拍摄夜景时使用它可使夜间的灯光呈现十字、六星或米字形的光芒，加强了渲染效果。（5）柔光镜镜片上制作有同心圆或其它形式的条纹，以增加漫射光，使相片柔化，朦胧。

常用在拍摄人像时用。有的时候，柔和的影像比清晰的影像更能产生气氛，给人以美感。

柔光镜适合于人像拍摄和风景拍摄，对于人像的皮肤、皱纹或者人物面部的瑕疵有抑制美化作用。柔光镜可以为你带来柔和而浪漫的气氛，为你演绎温柔的主题。

这种效果往往用软件做不到它的效果，因为它是清晰中来表现柔化，不是一种模糊。（6）广角附加镜广角镜它可以缩短焦距，使得拍摄视角增大，从而增大拍摄范围。

镜头上标有的0.5X、0.7X表示的意思就是将焦距变为原来的0.5或0.7倍，比如原来焦距为35~的镜头，加上一个0.7X的广角镜后焦距范围就变为28~。(7)增距附加镜增距镜可以增大相机的焦距，增大相机的远摄能力。

镜头上标为2X的增距镜就是将焦距变为原来的2倍，同样是35~105nm的镜头，加上一个2X的增距镜焦距范围就变为70~了。原来的3倍光学变焦的相机就变成了6倍，拍摄的距离自然也就随之增加了。

`以上七种是目前较常用的附加镜，还有几种，基本属于特技镜。因为现在数码的相片可在电脑上作后期制作，这些效果在电脑上一般均做得出来，故这些附加镜的使用也相应使用、生产就减少了。

现列出一些，以供参考：（8）分身镜镜片较厚，将它磨制成多种形式的棱镜，使用时能使景物分成同样的几块，以达到特技效果。（9）近摄镜近摄镜正面凸起，背面微微凹进，外形很像放大镜，是一种类似于滤光镜拍摄附件。

如果在标准镜头前附加一枚近摄镜，其焦距就会立刻发生变化，因为近摄镜微凹的背面可以一定程度地减少像场弯曲。通常近摄镜按屈光度标定，如：+1、+2、+3等等（提示：屈光度+1，就是老化眼镜的+100度，屈光度+2，就是老化眼镜的+200度……）。

屈光度数值越大，放大倍率也就越高。这种镜片在操作时，可不作曝光补偿调整，能够单独或组合使用，非常便利，并且价格便宜。

但是近摄镜的像差不能完全消除，由于镜片是镜头的附加，可能还会轻微地影响到照片的清晰度。（10）半近摄镜半近摄镜一半有近摄镜片，而另一半是空的。

有近摄镜片的一半可将近处的画面拍摄清楚，另一半却是正常的，可以对远处的拍摄主题正常对焦，从而保证一个很近一个很远的物体同时在一个画面上都是清晰的，造成一种超大景深的效果。使用半近摄镜还可以使另一半画面完全不合焦，通常配合大光圈可以产生特殊的景深效果。

（11）中空镜中空镜中心是一块透明的玻璃，周围有条纹或灰色。使用这种镜片拍摄出的效果是中间呈现的景物清晰，四周景物模糊，像是经过了滤镜处理一样，使得照片充满艺术效果。

是一种比较特殊的滤镜。根据最终拍摄效果的不同可以分为中空雾化镜、中空柔焦镜、中空近摄镜等多种不同类型。

使用这种滤镜拍摄能够很好的将主体突出，但值得注意的是不能把光圈收的过小，否则会使四周模糊部分和中间清晰部分出现严重的边缘分界。

4.单反相机入门的常识是什么

初学数码单反相机的18个注意事项 1、用广角镜头拍出的照片四角发黑主要是由于闪光灯覆盖面与广角镜头的视场角不匹配。

老式闪光灯设计的闪光覆盖面大都只能与35mm的小广角镜头配套，28mm广角镜头的视场角比35mm镜头大12度，因此使画面四周受不到光而发黑。防止的办法有二条，一是在灯光上加散光罩，使闪光成为散射光，以扩大覆盖面；二是用白纱布蒙住灯头，让光线散射，使整个画面都能均匀受光。

2、画面影调模糊在排除了相机无故障和手震等原因后，就要检查镜头是否被灰尘覆盖或被污渍染涂。如遇到这种情况，切忌用嘴吹或毛巾擦。

应用吹气球吹去镜头上的尘土，再用镜头刷拂去杂物，最后用镜头纸擦拭，使镜片明亮如新。如仍有汗渍、指纹和油垢，就要送相机维修店用镜头清洁液仔细清除。

3、主体人物模糊，背景清晰可辨有两种可能，一是手动对焦相机对焦时，焦点没有对着主体或是主体对焦后，在构图中又移动了位置，未重新对焦，使主体不在景深范围之内；二是使用自动对焦相机时，没有按快门“锁定”焦点再重新构图，使焦点在构图中向别处飘移。 4、团体合影照片前几排清晰，后几排模糊凡是多排合影照，要保证每个人影像清楚，就要做到三点：一是选择性对焦。

五排人合影，选择第二排的对焦；七排人合影，选择第三排人对焦。二是光圈不要设定太大，一般以f4-8为宜，以保证有足够的景深。

三是快门速度不要低于1/60秒，以免有人头部转动使影像发虚。 5、胶卷没有曝光主要原因有二：一是傍轴取景相机拍摄时忘记揭镜头盖，取景器中景物清晰，但成像光线没有进入镜头，胶片没有感光。

二是手动卷片的135单反相机装片不到位，卷片时没有注意看暗盒片轴是否在相应转动。由于片头滑脱，搬动卷片把手时，虽然快门上了弦，计数器照常计数，但胶片在暗盒中纹丝未动，计数器虽显示36张拍完，实际上没有一张胶片感光。

6、照片四角有黑影主要原因有二：一是遮光罩与镜头焦距不匹配。把50mm标准镜头的遮光罩用于28mm焦距的广角镜头就会阻挡进入镜头的光线。

因标头的视场角为47度，而28mm广角镜头的视场角为75度。二是用28mm广角镜头拍摄时，原已在镜头上戴有一块UV镜，如再戴一块偏光镜的话，由于偏光镜是两片玻璃叠合而成，边框很厚，再加在UV镜的边框，必然遮挡进入镜头的光线，使照片四角发黑。

用广角镜拍摄时如需用偏光镜，一定要先卸下UV镜后再装偏光镜，才能使画面均匀受光。 7、影调死白或晦黑，缺乏影纹层次无论照片是黑白或是彩色，只有曝光准确，才能获得明快的影调和丰富的层次。

照片死白是曝光过度；照片晦黑是曝光不足。机内测光系统是按18%的中灰反光率设计的，它可以使大多数景物曝光准确，色彩还原，但遇到某些特殊光线或景物，就需要在测光的基础上进行修正。

如拍摄雪景如不增加1.5-2级曝光量，白雪就会成为灰白色；如拍摄煤炭，如不减少1.5-2级的曝光量，黑色煤炭就会变成深灰色。因为无论多么高级的相机，也没有思维功能，只会把一切景物千篇一律地按反光率为18%的中灰色调处理。

8、用电子闪光灯摄的照片仍然曝光不足原因有二：一是光圈设定过小。闪光灯的闪光速度一般都在1/1000秒以上，快门已失去控光作用，主要靠光圈大小控制曝光量。

没有自动档的闪光灯拍照，要先计算光圈系数。二是闪光灯电力不足。

新买的闪光灯要经过十余次的充、放电，让灯内电容活跃后再正式使用。旧闪光灯充电信号灯点燃只充了70%，在点燃10秒钟后才能真正充满电能，供正常使用。

9、单反相机用闪光灯拍出的照片，有半幅画面是黑影这是由于单反相机的帘幕快门与闪光灯不同步所致。单反相机用闪光灯拍照，要注意相机的闪光同步（各相机速度不同）。

10、人像照片背景清晰艳丽，人物脸膛昏黑一是逆光拍摄时使用了平均测光，又没有对人物面部补光；二是背景明亮（雪景、沙漠、海滩），使用了内测光推荐的数据进行曝光，背景曝光适度，人物曝光不足。对此有三种办法解决：一是用闪光灯对人物进行补光；二是在测光的基础上加大1-2级曝光量；三是走近人物对准脸部测光，“锁定”曝光量后（用测光记忆钮或改为手动曝光），再退回原位构图，对焦，拍摄。

11、团体合影，周边人物残缺这有两种情况，一是用平视取景相机拍摄时忽略了视差，画面装得过满；二是使用单反相机虽无视差，但画面四周没留余地，扩印时四周压掉了一些画面，彩扩机只扩印出底片画面的95%左右。所以无论使用什么相机，构图时都要留有一定的余地。

切忌人物顶天立地，塞满画面。 12、照片有划痕如果是底片上有划痕，可能是两种情况造成的。

一是大盘片分装卷使用的旧暗盒被污染，出片口绒布上夹有砂粒，划伤了胶片；二是相机背后的压片板上有毛刺，卷片划伤了胶片。使用分装卷前，最好把片头缩进暗盒，用吹气球和毛刷仔细对出片口的绒布进行清洁处理后，再引出片头使用。

如相机压片板有毛刺，可用一小块0号砂纸小心地磨掉（注意不要磨伤压板上的漆膜）。 13、整幅照片影调偏蓝一是色温很高造成的。

阴天或薄云蔽日的天气，自然光色温高达7000-。

5.单反相机入门知识

这个很多很多，先跟你介绍一些最基本的吧。从字母开始吧，以后你肯定用得到。

M是手动档，可以自己设置拍摄的快门光圈组合，当然还有白平衡等等，一句话都是自己设置的。

A是光圈优先，即可预先设定你所需要的光圈值，相机会根据测光给出相对应的快门值，可以自己设定白平衡等。

T(S)是快门优先，与光圈优先类似，只不过是先预设好快门，再由相机给出对应光圈，可以自己设定白平衡等。

P就是程序暴光，光圈快门都有相机给出，但可以自己设定白平衡等。

还有一个就是绿色的或红色的标志，就是自动档，也可能些AUTO字样，就是全自动，所有参数均有相机给出，拍摄者做的只是按下快门。

这些都是基础的东西，建议楼主先看看相机的说明书，拍照首先得掌握自己的机子的性能啊。

摄影也不是一两句话可以说清的，楼主有机会再多看跟摄影相关的知识，都是多拍慢慢积累而提高的。初学者可先从摄影构图入手。

拍照时多动开脑筋，只要有丰富想法的摄影者才能够有精彩的照片而不是单纯的按个快门。

最后祝楼主通过不断学习能拍出好照片，拍出自己喜欢的照片。

6.单反相机的镜头知识和用法

数码相机中单反相机镜头的各种参数指标及其含义每家的标识都不一样哦镜头标识的含义（佳能篇） AFD:Arc-Form Drive 弧形马达为早期EF镜头的AF驱动而开发的弧形直流马达。

与USM马达不同，AFD马达对焦是有声的。 DO:Multi- Layer Diffractive Optical Element 多层衍射光学元件 Canon於2000年9月4日宣布研制成功世界上第一片用於照相机摄影镜头中的“多层衍射光学元件”。

多层衍射光学镜片同时具有萤石和非球面镜片的特性，所以该镜片的推出，是光学工业的一个里程碑。衍射光学元件最重要的特性是波长合成结像的位置与折射光学元件的位置是反向的。

在同一个光学系统中，将一片MLDOE与一片折射光学元件组合在一起，就能比萤石元件更有效地校正色散（色彩扩散）。而且，通过调整衍射光栅的节距（间隙），衍射光学元件可以具有与研磨及抛光的非球面镜片同样的光学特性，有效地校正球面以及其他像差。

代表镜头：EF 400/4 DO IS USM EF: Electronic Focus 电子对焦佳能EOS相机的卡口名称，也是EOS原厂镜头的系列名称。 EMD:Electronic-Magic Diaphragm电磁光圈所有EF镜头的电磁驱动光圈控制元件，是变形步进马达和光圈叶片的一体化元件，用数位信号控制，灵敏度和精确度都很高。

FL:Fluorite 莹石一种氟化钙晶体，具有极低的色散，其控制色差的能力比UD镜片还要好。从严格的意义上来说，莹石不是玻璃，而是一种晶体。

它的折射率很低（1.4）而且不受潮湿影响。莹石镜片一般不会暴露在外，所以你不大会直接接触到。

莹石镜片不如普通玻璃耐冲击，但也不像想像中的那麽易碎，所以在使用中并不需要特殊的照顾。 FTM:Full-time Manual Focusing 全时手动对焦即无论什麽时候，即使是镜头正在自动对焦时，都能用手动调节对焦，不会损坏镜头。

L: Luxury 豪华佳能专业镜头的标志。和消费级镜头相比，L头带有研磨非球面镜片、UD（低色散）、SUD（超低色散）或者Fluorite（萤石）镜片，这些是镜头出色的光学品质的重要基础。

通常镜头的构造品质也要优秀很多。其标志为镜头前端的红色标线，是佳能的高档专业镜头。

代表镜头：EF70-200/2.8 LU IS:Image Stabilizer 影像稳定器影像稳定器是通过修正光学部件的运动减小手颤动对成像的影响，所以也称防手震镜头。在IS镜头中，装有一个陀螺感测器，它能检测手的振动并把它转化为电信号，这个信号经过镜头内置的电脑处理，控制一组修正光学部件作与胶片平面平行的移动，抵消手颤动引起的成像光线偏移。

这个系统能够有效地改善手持拍摄的效果，对一般情况而言，IS镜头允许您使用比理论上低两级的快门速度。也就是说，您用普通300毫米镜头时，只能选择1/250秒以上的速度，而使用300毫米IS镜头就可以用1/60秒拍出清晰的照片。

代表镜头：EF28-135/3.5-5.6 U IS MM:Micro-Motor 微型马达这是传统的带传动轴的马达。比较费电。

不支持全时手动（FTM）。多用於廉价的低档次镜头。

SF:Soft Focus 柔焦镜头用这种镜头拍摄出来的照片与相机移动或调焦不实的效果大不相同，它利用刻意设计的球面像差，而使被摄景物既焦点清晰又柔和漂亮。柔焦的效果视光圈大小及专门的调节装置而有强弱之分。

代表镜头：EF135/2.8SF S-UD:Super Ultra-low Dispersion 高性能超低色散镜片一片S-UD大体与用一片萤石镜片的效果相近。 TS:Tilt Shift 移轴镜头移动镜头光轴调整透视的镜头。

移轴镜头的作用，除了纠正透视变形，还能调整焦平面位置。正常情况下，相机焦平面与胶片平面平行，用大光圈拍摄，焦平面的景物清晰，焦外模糊；若用移轴镜头调整焦平面，能改变清晰点。

显然，移轴镜头最合适建筑、风景和商业摄影。 EF移轴镜头不设AF功能。

佳能的TS镜头目前有TS-E24/3.5L、TS-E45/2.8和TS-E90/2.8三款. UD: Ultra-low Dispersion 超低色散镜片一种特殊类型的光学玻璃，由於能够控制光谱中光线的色散现象，被广泛用於镜头的色差控制。两片UD一起用大体与用一片萤石镜片的效果相近。

USM/U:Ultrasonic Motor 超声波马达大部分EF镜头使用的对焦马达类型，利用频率在超声波区域的振动源转动的马达，是实现宁静、高速AF的主要部件。EF镜头的超声波马达有两种，环形超声波马达（Ring-USM）、微型超声波马达（Micro-USM）。

采用超声波马达的镜头在前端有一**环，标记著”ULTRASONIC”。环形超声波马达是佳能中高级USM镜头使用的对焦马达，其驱动元件是环形的，在驱动时不需要使用任何齿轮之类的传动件。

因扭矩很大，所以启动和制动的速度比一般的对焦马达快很多。全时手动只能在环形超声波马达头中实现，要注意如EF 200/1.8L、EF 500/4.5L和EF 600/4L、EF 50/1.0L、EF 85/1.2L等不能实现全时手动。

微型超声波马达是一种小型圆柱状超声波马达，在速度和安静程度上不如环形超声波马达，而且不能全时手动对焦，但因其较低的制造成本，所以较多用在中低档的EF镜头上。尼康的你前面那个问题里回答了就不占地方宾得镜头讲解： A:A系列手动对焦镜头。

AF/MF：手动/自动对焦全程切换。 AL:Aspherical非球面镜片。

CF Micro:。

7.求单反相机的常识

入门级单反首选性价比异常出色的宾得k-x 行货套机才4000左右其强大的金属框架机身是其他品牌的全塑料机身无法比拟的其综合性能超越其他品牌5000以上的产品宾得是一家里是悠久的厂家也是第一家同时生产135单反（目前我们使用的主流单反包括全画幅都属于135范畴）相机机身以及镜头的厂家曾几何时宾得就是单反相机的代名词时至今日仍有不少大中画幅的宾得单反相机仍然被使用因此它的能力和信誉是毋庸置疑的

宾得k-x是一款非常具有性价比的相机它具有1200万有效像素和尼康中端甚至高端的机型一致达到了主流水平而实际上宾得k-x使用的CMOS 是同样为索尼代工的和尼康中端的D90使用是同一型号因此k-x的主要性能和D90是一致的不同的是由于k-x面对的是入门级用户因此它省略入门级用户很少使用的肩屏而今在LCD上面显示拍摄参数而宾得独有的SR机身防抖技术以及机身马达驱动系统也使得宾得在制造镜头的时候在控制成本的框架下面可以把更多的资源头放在光学部分而不需要预留镜头防抖组件镜头驱动组件的花费因此宾得的套头（指18-55套头）虽然在各个厂家中价钱是最低廉的但光学性能却很可能是最出色的只有宾得在这个定位的套头上使用了顶级的SMC镀膜其他厂家基本都把这个级别的镀膜技术放在中端镜头以上而且SR机身防抖技术还有另外一个积极意义就是当你以后扩展镜头尤其是定焦和长焦镜头的不需要为缺少防抖技术或者防抖镜头的昂贵而烦恼机身上面的防抖组件就为你完美地解决了这个问题是你可以更专注于拍摄的本身而不是为了控制成本而四处奔波上面

1. 单反相机入门的常识是什么

初学数码单反相机的18个注意事项 1、用广角镜头拍出的照片四角发黑主要是由于闪光灯覆盖面与广角镜头的视场角不匹配。

2、画面影调模糊在排除了相机无故障和手震等原因后，就要检查镜头是否被灰尘覆盖或被污渍染涂。如遇到这种情况，切忌用嘴吹或毛巾擦。

五排人合影，选择第二排的对焦；七排人合影，选择第三排人对焦。二是光圈不要设定太大，一般以f4-8为宜，以保证有足够的景深。

6、照片四角有黑影主要原因有二：一是遮光罩与镜头焦距不匹配。把50mm标准镜头的遮光罩用于28mm焦距的广角镜头就会阻挡进入镜头的光线。

没有自动档的闪光灯拍照，要先计算光圈系数。二是闪光灯电力不足。

切忌人物顶天立地，塞满画面。 12、照片有划痕如果是底片上有划痕，可能是两种情况造成的。

如相机压片板有毛刺，可用一小块0号砂纸小心地磨掉（注意不要磨伤压板上的漆膜）。 13、整幅照片影调偏蓝一是色温很高造成的。

阴天或薄云蔽日的天气，自然光色温高达7000-。

2. 单反机的入门知识

单反机菜鸟入门（转贴） 0点在网上学习的时候看到这篇文章不错，凯发来和大家共享。

凳一般全手动相机的功能转盘上都有如下几个档： P，击A，刔S，刍M （其它功能略）所以要是想学学摄影，処想从手动中得到乐趣，凴买相机一定要带以上四个功能档。凯一般数码相机对P，凵A，刃S叫做部份手动功能，凇而M才称作全手动功能。

刕相信大多人买了相机后一直使用auto档，冻其它档很少接触，凛担心拍不好。凡准备工作：相机实际操作请看使用说明书，凛如果你连这些功能在哪里都不知道，凳就谈不上学习了。

凇因为你的相机可能和我的不同，凼我说这功能上相机顶上？柯达是在机身后面的。凷佳能A系是在机顶上的。

凤什么按纽调整里面的参数，刊都要看一看。凛看完说明书后你知道这几个档是如何操作的了，凣但熟练则是靠多用、多比较、多练。

凹假设你已经知道这些功能在相机上的位置及调整方法，刍那么就可以：实操： 1、善用P档（程序自动爆光）来学习M档（全手动）其实P档与自动档（auto完全由相机自动控制）区别不大，刄常用它来拍比自动档auto要好一些，凛可以手动调整ISO/白平衡/色彩模式等功能，刧但光圈和快门是程序自动由测光结果产生的。凪当P档半按快门不放时进行自动测光得出光圈与快门值，凹LCD屏上出现此时的光圈与快门的值如：- 1/125 - F4.0 这就是自动测光的结果以此搭配，刐我们将功能转盘，凷转到M档，出这时看到屏幕上有快门与光圈值的调整我们按set键选择其一用方向键左右/上下将快门速度调到 1/125秒再按set键箭头指在光圉值上，刚将F值调到 F4.0 （以上按键各相机有不同，刃不过大同小异）这时M档的“爆光值”就和刚才P档操作时相同了，凙拍出的相片也是同样效果（光线充足时与AUTO档相似） 2、M档应用最基本的两个方面拍风景时，刢经常拍得天空太亮：过爆拍人像时，刈经常拍的人物过暗：爆光不足这时我们可以用M档，凡对着景物先用P测光得到快门与光圈值假设得到的值是：1/250秒 F5.6 我们在拍风景时，凗屏幕大部份画面是天空，刈这时可能会过量爆光，凯我们在M档可以减少一到两档光圈如 1/250秒 F7.1 （数值越大光圈越小）或 1/150秒 F5.6 或 1/200秒 F7.1 这样就减少了爆光量，刑跟据实际情况，删选择适合的快门与光圈组合很到理想的效果。

击如果是拍人物，判我们会发现背影光很强，凼使得人物爆光不足面部偏暗，划除了用闪光灯补光外，刉我们还可以M档降低速度或增大光圈值，删如 1/125秒 F5.6 或 1/200秒 F4.0，凸这样我们就增加了爆光量，刏这个时候就可以保证了人物的爆光正常，分但背景也许会爆光过量，分但这时的人物是主体，凞如果反差太大，凝我们就可以选择其它方式，刧如不要在逆光下、用反光板、闪光类等手段。刣实际操作时我们可以拍多几张，初来达到我们想要的效果，凑初学习时多在电脑上对比，凖可以用软件ACDSEE看的基本信息，刅得到我们当时拍的相片时的爆光值。

分这样就可以对自己拍的进行评价与改进。凭当觉得M档难以控制，凤那么初级阶段，出那还是多用用A、S两档，凓下面我们就来介绍一下这两个功能的区别： 3、S（快门优先）、A（光圈优先） ·快门优先把相机转盘调到s处，划或者在菜单设置曝光模式为s，凝即是快门优先功能，凶快门速度由你设定，凎光圈值程序跟据测光自动得出。

凷快门优先多用于拍摄运动的物体上，処例如体育运动、行使中的车辆、瀑布、飞行中的物体、烟花、水滴等等。函很多朋友在拍摄运动物体时发现，凸往往拍摄出来的主体是模糊的，刏这多半就是因为快门的速度不够快。

凣在这种情况下你可以使用快门优先模式，凹大概确定一个快门值，凴然后进行拍摄。出并且物体的运行一般都是有规律的，凟那么快门的数值也可以大概估计，刈例如拍摄行人，凯快门速度只需要1/125秒就差不多了，刟而拍摄下落的水滴则需要1/1000秒。

切另外如：拍烟花效果为了获得大面积烟花绽放的效果，凙我手动设置了快门值为8秒，几因此拍出了一张绚丽奇彩的烟花，凙如果不是使用快门优先而是光圈优先或者自动曝光，刢那拍出来的烟花因为曝光时间太短画面可能只是几点“星星之火”。凸 ·光圈优先转到“A”字母处就是光圈优先了，则有的是在菜单里面设置光圈优先的。

分光圈优先就是手动定义光圈的大小，刊相机会根据这个光圈值确定快门速度。凯由于光圈的大小直接影响着景深，凬因此在平常的拍摄中此模式使用最为广泛。

刚在拍摄人像时，刀我们一般采用大光圈长焦距而达到虚化背景获取较浅景深的作用，刨这样可以突出主体。划同时较大的光圈，凮也能得到较快的快门值，凼从而提高手持拍摄的稳定。

判在拍摄风景这一类的照片时，凼我们往往采用较小的光圈值，刓这样景深的范围比较广，刊可以使远处和近处的景物都清晰，刡同样这一点在拍摄夜景时也适用。凣不过对于素质不佳的镜头，凊光圈全开时相片成像质量会受到一定的影响，凹镜头在较小的光圈下通常成像质量较好同样可以用S档和A档半按快门所得的测光值来使用M档。

凾什么情况下用什么档去拍，出这时已。

3. 求高手赐教

一个一个问题来吧：1、单反，就是单镜头反光照相机，简单讲就是把传统高档使用反光板的相机的胶卷换成了数码感光元件的数码相机，它在很多性能（速度，宽容度，景深，高感）上有卡片机完全无法比拟的优势。

限于篇幅跟新手能否理解的问题，这个在百度百科上面有详细的原理解释，新手直接把它看做“取景窗看到的即为拍到的，拍照速度很快（3张到8张每秒），价格不菲的高档相机”即可2、曝光和光圈知识，请参考下面的推荐教材，铺开了说又是一大堆简单讲，曝光涉及三个因素：快门速度，光圈大小，ISO，这三个参数都会影响曝光结果3、有关品牌：简单讲，就是人像佳能，风景尼康说的是佳能拍MM皮肤白点好看点，尼康锐，拍风景跟男人合适些（但不见得就不能拍MM）选购单反看的参数很多，稍微给您点有关参数的建议：单反很昂贵，您要根据自己需要慢慢选择单反的参数太多了，列出几个关键参数您值得往上砸钱的：1、感光元件大小：菜鸟会说像素越高越好，老鸟会说感光元件越大越好，感光元件越大意味着高感下表现越优秀，宽容度越高，CMOS优于CCD记住：像素绝对不是越高越好，像素只是参考作用，成像质量跟机身，镜头都有关！2、对焦系统：对焦点越多，越好，同样对焦点情况下十字对焦点越多，性能越优秀，对焦系统对抓拍，捕捉快速镜头十分有用，是单反的主要参数之一3、机身，小的，塑料的比较低档，大的，金属的比较高档，实在对各种参数感到迷糊的话，这个是个一定管用的判断标准4、是否有机身对焦马达，有对焦马达的能自动对焦，否则只能上有对焦马达的镜头或者手动对焦，这个决定了您是否能用性价比高的低端镜头，带马达的镜头都很贵，相比机身对焦有些慢，而且比较高档，您得慎重考虑5、取景器覆盖率，这个是光学性能，非常重要！范围越大愈好，高档机基本都是100%6、连拍速度决定抓拍性能，处理器型号影响最终画质（越新的处理器越好）都比较重要7、全画幅机跟半幅机在画质，宽容度上有质的区别，对镜头选择也非常重要8、是否有钱上一支成像好的镜头是最终照片质量的决定因素9、机身防抖：有一个防抖的机身是非常方便的10、高感光度表现：夜景（特别是日出日落）拍摄非常重要，这个要看具体机身对比，实际效果跟参数关系不大不值得砸钱的功能：1、视频照相机CMOS连续工作会影响寿命，而且实用意义不大，您买的毕竟是相机，不是DV吧？2、LCD分辨率：照片在电脑上看都是一样的，毕竟您最终会用电脑而不是相机来欣赏作品吧3、过高的快门速度：例如1\4000秒快门跟 1\8000秒快门区别不大，那个是拿来拍子弹穿过苹果啥的用。4、除尘系统：没有良好的使用习惯，再好的除尘系统也得老老实实拿到售后去清洁。

5、是否翻转屏：基本就是一个噱头6、手感，外观：仁者见仁智者见智了，每个人的感觉都不一样，您感觉“专业”的机身，别人有可能感觉是“笨重”也说不定。7、N,C之选：新手价位的话选哪家都差不多，作为佳能黑的我认为低端尼康还是比较厚道的，而玩高端的话就应该选佳能了，低端的宾得性价比非常高也值得考虑（纯个人意见）给个网站：蜂鸟网讲基础中关村在线查数据必看推荐教材《纽约摄影学院教材》，这个是很经典的从0开始学摄影的入门书看完了你不仅入门，就是中级技术了，可以考中级摄影师资格证的慢慢来如上，希望能帮上忙。

4. 怎样学习单反相机知识

从光圈、快门、焦距、感光度学起，再学习端稳相机，这些都是基本功，然后就是构图，用什么都能练习构图，旁轴、单反、卡片机、甚至是手机，四根手指。

我最初看一些器材和各种题材摄影的书，后来看构图方面的书。现在你看看纽约摄影学院出的书吧，少看那些什么单反相机速成、圣经之类的，误人子弟，看看操作之外的书，比如摄影思想。

看一些摄影，绘画作品，增加自己的鉴赏力。拍照时千万不要用自动档，全手动是极有乐趣的，没照好不要怪相机，想想自己哪做的不对，哪些方面还要改进，多听听摄影思想方面的忠告，多谈技术与想法，多想想按快门之前的事；少依赖后期，少谈论照相机，少买卖照相机。

实践是最重要的，我自己总结的步骤，下面每一步都是练好了再练下一步。第一步：拍摄相片内所有景物都清晰的照片。

第二步：拍摄相片内主体清晰其他模糊的照片。第三步：以高速快门拍摄。

第四步：以低速快门拍摄。第五步：拍摄低速运动的物体。

第六步：拍摄高速运动的物体。第七步：夜间拍摄。

第八步：拍摄低调照片。第九步：拍摄高调照片。

第十步：追随拍摄。第十一步：摆拍，用自然光。

第十二步：摆拍，自己部光。第十三步：抓拍，表现大场面。

第十四步：抓拍，表现人物表情。第十五步：想方设法把自己拍进照片，而照片中不出现相机。

第十六步：自己创新。第十五步以前禁止用闪光灯。

你会觉得以上越来越难，但通过了，自己的水平就涨一块。

5. 怎样学习单反相机知识

从光圈、快门、焦距、感光度学起，再学习端稳相机，这些都是基本功，然后就是构图，用什么都能练习构图，旁轴、单反、卡片机、甚至是手机，四根手指。我最初看一些器材和各种题材摄影的书，后来看构图方面的书。现在你看看纽约摄影学院出的书吧，少看那些什么单反相机速成、圣经之类的，误人子弟，看看操作之外的书，比如摄影思想。看一些摄影，绘画作品，增加自己的鉴赏力。拍照时千万不要用自动档，全手动是极有乐趣的，没照好不要怪相机，想想自己哪做的不对，哪些方面还要改进，多听听摄影思想方面的忠告，多谈技术与想法，多想想按快门之前的事；少依赖后期，少谈论照相机，少买卖照相机。

实践是最重要的，我自己总结的步骤，下面每一步都是练好了再练下一步。第一步：拍摄相片内所有景物都清晰的照片。第二步：拍摄相片内主体清晰其他模糊的照片。第三步：以高速快门拍摄。第四步：以低速快门拍摄。第五步：拍摄低速运动的物体。第六步：拍摄高速运动的物体。第七步：夜间拍摄。第八步：拍摄低调照片。第九步：拍摄高调照片。第十步：追随拍摄。第十一步：摆拍，用自然光。第十二步：摆拍，自己部光。第十三步：抓拍，表现大场面。第十四步：抓拍，表现人物表情。第十五步：想方设法把自己拍进照片，而照片中不出现相机。第十六步：自己创新。第十五步以前禁止用闪光灯。你会觉得以上越来越难，但通过了，自己的水平就涨一块。

6. 单反相机怎么拍照技巧

1、拍静止的小东西的特写，如花、鸟、虫：用Av档，光圈最好在f5.6或以下，焦距最好50以上，尽量在1m以内拍摄，使背景虚化！光线好的话，iso100，光线不好的话，iso最好400以内。

2、拍人：基本都是使用较大的光圈（f5.6以内）、50mm以上的焦距，拍摄距离视全身、半身、大头照而定，使背景虚化，使用Av档！光线好，iso100，光线不好，iso400以内。运动中的人使用追拍，体现运动感（详见下面的运动物体的拍摄）！3、拍景：Av档，使用适当的光圈，f8以上吧，焦距随便，但是，一般广角端都有畸变，酌情使用。

4、拍夜景：上三脚架，Av档，自定义白平衡或白炽灯，f8以上的光圈，小光圈可以使灯光出星光的效果，使用反光板预升功能，减少按快门后，反光板抬起引起的机震；并用背带上的那个方盖子，盖住取景器，以免杂光从后面进入影响画质；iso200以内，尽量使曝光时间加长，这样可以使一些无意走过的人从画面消失，不留下痕迹，净化场景！例如拍一个广场，人来人往，可以使用很小的光圈f20左右，iso100，这样，曝光时间就会很长，那么，走动的人影，不会留在照片上！广场将会很干净！5、拍烟花：使用快门线，B快门，可以拍出多烟花重叠的效果！6、拍运行的东西：光线好的情况：Av档，光圈大小酌情处理；使用f8以上的光圈得到大景深效果，使用小光圈得到浅景深的效果；想拍很有动感的效果，可以使用Tv档，快门1/30左右，对焦按快门的同时，镜头以合适的速度追着对象移动，会出很动感的效果！光线不好的情况：只能酌情处理了，再加上使用追拍！7、拍流水或喷泉：使用Tv档，1/50左右的快门速度，可以拍出缎子的效果，如果使用太快的快门，喷泉拍出来就都是不连续的水滴了！8、夜间人像留影：上三脚架，调节白平衡，自动或自定义白平衡；iso100-400;Av档，光圈f8左右，使用慢速同步闪光，后帘闪光模式；此时，闪光灯会闪两次，按下快门闪一次，曝光结束前会再闪一次，所以在闪两次前，人不要离开。这样拍出来可以使人物清晰，背景霓虹也很漂亮，不至于背景曝光不足而过暗。

Av光圈优先技巧：1.不管拍啥.除非要保持安全快门，不然别开最大光圈拍。2.拍风景请尽量使用F8~F11的光圈。

3.拍人物及静物特写可使用最大光圈缩1~2级之光圈。4.安全快门请尽量控制在焦距倒数以上.广角端快门也要在1/30秒以上比较保险.若快门不足请提高光圈或ISO。

测光方式：1.测光不要对着天空，不要对着最暗的地方.要去抓中间值。2.依照你拍的题材，善用测光模式（权衡测光.点测光.中央重点测光。）

3.若遇到测光抓不准的时候，请用AElock对身边灰色的东西曝光锁定后再来拍摄。

4.尽量别对白色或黑色物体测光，不然就请记得黑要减EV、白要加EV。EV即曝光补偿曝光补偿也是一种曝光控制方式，一般常见在±2-3EV左右，如果环境光源偏暗，即可增加曝光值（如调整为+1EV、+2EV）以突显画面的清晰度。

小型数码相机大多通过菜单来调节曝光补偿数码相机在拍摄的过程中，如果按下半截快门，液晶屏上就会显示和最终效果图差不多的，对焦，曝光一切启动。这个时候的曝光，正是最终的曝光度。

如果明显偏亮或偏暗，说明相机的自动测光准确度有较大偏差，要强制进行曝光补偿，不过有的时候，拍摄时显示的亮度与实际拍摄结果有一定出入。数码相机可以在拍摄后立即浏览画面，此时，可以更加准确地看到拍摄出来的画面的明暗程度，不会再有出入。

如果拍摄结果明显偏亮或偏暗，则要重新拍摄，强制进行曝光补偿。拍摄环境比较昏暗，需要增加亮度，而闪光灯无法起作用时，可对曝光进行补偿，适当增加曝光量。

进行曝光补偿的时候，如果照片过暗，要增加EV值，EV值每增加1.0，相当于摄入的光线量增加一倍，如果照片过亮，要减小EV值，EV值每减小1.0，相当于摄入的光线量减小一倍。按照不同相机的补偿间隔可以以1/2(0.5)或1/3(0.3)的单位来调节。

被拍摄的白色物体在照片里看起来是灰色或不够白的时候，要增加曝光量，简单的说就是“越白越加”，这似乎与曝光的基本原则和习惯是背道而驰的，其实不然，这是因为相机的测光往往以中心的主体为偏重，白色的主体会让相机误以为很环境很明亮，因而曝光不足，这也是多数初学者易犯的通病。由于相机的快门时间或光圈大小是有限的，因此并非总是能达到2EV的调整范围，因此曝光补偿也不是万能的，在过于暗的环境下仍然可能曝光不足，此时要考虑配合闪光灯或增加相机的ISO感光灵敏度来提高画面亮度。

一般的说，景物亮度对比越小，曝光越准确，反之则偏差加大。相机的档次有高有低，档次高的，测光就比较准确，低的则偏差也会加大。

如果是传统相机，胶卷的宽容度是比较大的，曝光的偏差在一定范围内不会有大问题，但是数码相机的CCD宽容度就比较小，轻微的曝光偏差都可能影响整体的效果。总而言之，曝光补偿的调节是经验加上对颜色的敏锐度所决定的，用户一定要多比较不同曝光补偿下的质量，清晰度、还原度和噪点的大小，才能拍出最好的。

注：佳能说明书上的光圈是指F数值，光圈越大，景深越大。一般人。

7. 单反相机入门知识

没有什么专供初学者使用的单反相机。

你如果要买单反相机，你可根据你目前的经济状况适当地选购一台，不必考虑什么初学不初学，什么入门不入门。

1、

在选购时有一点要注意：那就是品牌，因为各品牌之间的镜头不是相互通用的而且镜头和机身也是可以单独购置的。一但选择了某个品牌，一般来说，你将一直使用这个品牌。

因为如果机身今后要更新，你会舍不得原来的镜头，反过来也是一样。

2、

在经济能力许可的情况下尽可能买好点，正常情况下相机不是两三年就报废的你可以一直用下去

一直用到不可用为止。